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LB瓊脂培養基 (LB Agar)
型 號: LB瓊脂培養基 (LB Agar)
型號:028330
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規格:250g
特色:
1. 主要原料成份來自歐美。
2. 粉末均勻顆粒細微,溶解快速成澄清透明溶液。
3. 瓊脂凝固點較其他品牌同類產品低,利于平板制作。
4. 瓶身瓶蓋皆為避光塑料材質,防潮性佳。
用途:LB瓊脂培養基用于一般細菌培養,特別用于分子生物學試驗中大腸桿菌的保存和培養。
原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;葡萄糖提供碳源;瓊脂是培養基的凝固劑。
最終pH7.0±0.2
使用方法:
1. 稱取本品36g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃滅菌15min,待冷至50℃左右傾注平板,備用。
2. 取待檢菌接種于平板或斜面上于36±1℃培養24h。
3. 觀察結果。
質量控制:下列菌株接種后于36±1℃培養24h結果如下。
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LB肉湯 (LB broth)
型 號: 028320
特色:
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1. 1. 主要原料成份來自歐美。
2. 粉末均勻顆粒細微,溶解快速成澄清透明溶液。
3. 瓶身瓶蓋皆為避光材質,防潮性佳。
用途:用于一般細菌培養,特別適用于分子生物學試驗中大腸桿菌的保存和增殖。
原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;葡萄糖提供碳源。
使用方法:
1. 稱取本品21g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝試管或三角瓶,121℃滅菌15 min,備用。
2. 取待檢菌接種于LB肉湯中于36±1℃培養24h。
3. 觀察結果。
質量控制:菌株接種后于36±1℃培養24h結果如下。
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一般營養瓊脂培養基 (Nutrient Agar)
型 號: 022021
用途:營養瓊脂培養基用于一般細菌總數測定,保存菌種及純培養。
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原理:胨和牛肉浸出粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉能維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑。
使用方法:
1. 稱取營養瓊脂培養基32.0g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用。
2. 劃線接種至營養瓊脂斜面中。
3. 30~35℃培養18~24h。
4. 觀察結果。
質量控制:本品接種下列菌株,置于30~35℃溫箱中培養18~24h
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營養瓊脂 (Nutrient Agar)
型 號: 022020
用途:營養瓊脂用于細菌總數測定、保存菌種及純培養,也可用于消毒效果測定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ,GB/T4789.2-2003,GB15979-2002和GB15981-1995,ISO標準)。
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原理:蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉能維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑。
使用方法:
1. 稱取營養瓊脂33g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用。
2. (食品)以無菌操作稱取檢樣25克(或25mL),放入含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的玻璃三角瓶中(瓶內預置適當數量的玻璃珠),充分振搖,即為1:10的均勻稀釋液。依次做1:100,1:1000……稀釋液。
3. 根據對樣品污染情況的估計,選擇2—3個合適的稀釋度,分別在做10倍稀釋的同時,吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中,每個稀釋度做2個平皿。
4. 稀釋液移入平皿后應及時將涼至46℃左右的培養基注入平皿約15mL,并轉動平皿使混合均勻,同時將營養瓊脂培養基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內作空白對照。待瓊脂凝固后,倒置于36±1℃溫箱中培養48±2h。
5. 觀察結果。
6. 菌落計數方法:做平板菌落計數時,可用肉眼觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏,在計下各平板的菌落數后,求出同稀釋度的各平板平均菌落總數。
7. 菌落計數的報告:選取菌落數在30—300之間的平板作為菌落總數測定標準。一個稀釋度使用兩個平板,應采用兩個平板平均數,其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數,若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個平板后乘以2以代表全皿菌落數。平皿內如有我鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線),若僅有一條鏈,可視為一個菌落;如有不同來源的幾條鏈,則應將每條鏈視為一個菌落計。
A:稀釋度的選擇:
應選擇平均菌落數在30—300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數報告之(如下表)。 若有兩個稀釋度.其生長的菌落數平均在30—300之間,則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2,則應報告其平均數;若大于2則報告其較小的數字(例2及3)。
若所有稀釋度的平均菌落數均大于300,則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(例4)。若所有稀釋度的平均菌落數均小于30,則應按稀釋度最底的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(例5)。
若所有稀釋度均無菌落生長,則以小于1乘以最底稀釋倍數報告之(例6)。
若有稀釋度的平均菌菌落數均不在30—300之間,其中一部分大于300或小于30時,則以最接近30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(例7)。
B:菌落數的報告:
菌落數在100以內時,按其實有數報告,大于100時,采用二位有效數字,在二位數字后面的有效數值,以四舍五入法計算。為了縮短數字后面的零數,也可以用10的指數來表示。